1.TLC概述

◆定義:將固定相與支持物***成薄板或薄片，流動相流經該薄層固定相而將樣品分離的層析系統

◆原理:色譜法的基本原理是利用混合物中各組分在某一物質中的吸附或溶解性能的不同，或和其它親和作用性能的差異，使混合物的溶液流經該種物質，進行反復的吸附或分配等作用，從而將各組份分開。

◆特點:樣品用量少(微克～毫克級)，分析快速

◆分類:按所用固定相材料不同，分為吸附、分配、離子交換、凝膠過濾等薄層層析。我們常用的硅膠，氧化鋁層屬于吸附色譜。

圖1

2.點樣一成功分離的關鍵

a.點樣原點小而圓，直徑盡量不受超過2mm

b.在便于顯色的前提下，點樣量盡量少，防止過載施尾或掩蓋Rf相近的點

C.點樣勿傷及薄層表面

d.點樣原點盡量遠離薄層邊緣，至少相隔3mm，減少邊緣效應

e.選擇規則的矩形薄板;

f.所有點樣點要保持在一條與底邊平行的直線上，務必點交又點

g.點樣完后，溶劑用電吹風盡量吹千

圖2

3.展開技巧

a.盡量用新配制展開劑

b.展開劑用量適中，不能漫過點樣原點

c.展開缸蓋的密封性要好;

d.薄層板側邊不能貼到展開缸壁;

e.理想的展開位置為保證Rf值在0.2-0.8之內

f.薄層板盡量用鑷子夾住小心放入展開缸中.，而不是用手捏住放入

圖3

◆看板注意這幾點：一看、二照、三碘、四顯

a.用攝子小心取出薄層板，吹千溶劑荊;

b.首先在目光下觀察，劃出有色物質的斑點位置;

c.在紫外燈下觀察有無暗斑或熒光斑點

d.大部分有機物會吸附碘，可逆的產生棕色或黃色斑點;e既無色又無紫外吸收的物質，可以用顯色劑顯色f千萬注意，等高的點，不一定是同一個物質

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