大家好，今天本篇文章就來給大家分享革蘭氏染色的注意事項(xiàng)，以及革蘭氏染色的注意點(diǎn)對應(yīng)的知識和見解，內(nèi)容偏長哪個，大家要耐心看完哦，希望對各位有所幫助，不要忘了收藏本站喔。
1、革蘭氏染色成敗的關(guān)鍵是酒精脫色。如脫色過度，革蘭氏陽性菌也可被脫色而染成陰性菌；如脫色時間過短，革蘭氏陰性菌也會被染成革蘭氏陽性菌。脫色時間的長短還受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影響，難以嚴(yán)格規(guī)定。
2、染色過程中勿使染色液干涸。用水沖洗后，應(yīng)吸去玻片上的殘水，以免染色液被稀釋而影響染色效果。
3、選用幼齡的細(xì)菌。G+菌培養(yǎng)12h-16h，E.coli培養(yǎng)24h。若菌齡太老，由于菌體死亡或自溶常使革蘭氏陽性菌轉(zhuǎn)呈陰性反應(yīng)。
擴(kuò)展資料：
在實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常會出現(xiàn)假陽性和假陰性的結(jié)果，假陽性主要是由于脫色不完全，可能是由于涂片過厚，或者是結(jié)晶紫染色過度，導(dǎo)致脫色不完全。假陰性可能是因?yàn)榧?xì)胞固定過度，造成細(xì)胞壁通透性的改變，而出現(xiàn)假陰性結(jié)果；另外，細(xì)胞培養(yǎng)時間太長，可能已經(jīng)有部分細(xì)胞發(fā)生死亡或者自溶，也導(dǎo)致細(xì)胞壁通透性的改變而出現(xiàn)假陰性結(jié)果，
參考資料來源：百度百科-革蘭氏染色
1、選用活躍生長期菌種染色，老齡的革蘭氏陽性細(xì)菌會被染成紅色而造成假陰性。
2、涂片不宜過厚，以免脫色不完全造成假陽性。
3、脫色是革蘭氏染色是否成功的關(guān)鍵，脫色不夠造成假陽性，脫色過度造成假陰性。
革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法，1884年由丹麥醫(yī)師、細(xì)菌學(xué)家漢斯·克里斯蒂安·約阿希姆·革蘭氏（HansChristianJoachimGram，1853-1938）創(chuàng)立。革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個步驟。
注意事項(xiàng):
1.選用活躍生長期菌種染色,老齡的革蘭氏陽性細(xì)菌會被染成紅色而造成假陰性。
2.涂片不宜過厚,以免脫色不完全造成假陽性。
3.脫色是革蘭氏染色是否成功的關(guān)鍵,脫色不夠造成假陽性,脫色過度造成假陰性。
***原理：
用于生物染色的染料主要有堿性染料、酸性染料和中性染料三大類。堿性染料的離子帶正電荷，能和帶負(fù)電荷的物質(zhì)結(jié)合。因細(xì)菌蛋白質(zhì)等電點(diǎn)較低，當(dāng)它生長于中性、堿性或弱酸性的溶液中時常帶負(fù)電荷，所以通常采用堿性染料（如美藍(lán)、結(jié)晶紫、堿性復(fù)紅或孔雀綠等）使其著色。
酸性染料的離子帶負(fù)電荷，能與帶正電荷的物質(zhì)結(jié)合。當(dāng)細(xì)菌分解糖類產(chǎn)酸使培養(yǎng)基pH下降時，細(xì)菌所帶正電荷增加，因此易被伊紅、酸性復(fù)紅或剛果紅等酸性染料著色。中性染料是前兩者的結(jié)合物又稱復(fù)合染料，如伊紅美藍(lán)、伊紅天青等。
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